聯(lián)系人：王經(jīng)理
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近年來(lái)，在液相色譜分析領(lǐng)域，“快速分析”的話題越來(lái)越多被提起。而在2020年版《中國(guó)藥典編制大綱》中，也提到“積極倡導(dǎo)綠色標(biāo)準(zhǔn)和經(jīng)濟(jì)標(biāo)準(zhǔn)，推廣采用毒性小、污染少、節(jié)約資源、保護(hù)環(huán)境、簡(jiǎn)便實(shí)用的檢測(cè)方法”。
“快速分析”能帶來(lái)的好處有很多方面，例如，方法開(kāi)發(fā)階段，提高分析速度可以節(jié)約分析時(shí)間；還可以節(jié)約有機(jī)溶劑、降低成本、保護(hù)環(huán)境，等等。
那么，當(dāng)我們談?wù)摽焖俜治鰰r(shí)，我們?cè)谡務(wù)撌裁矗?/strong>
快速分析的目的
● 增加每天所能分析的樣品數(shù)量（早點(diǎn)下班?。?/span>
● 謀求更高分離度（早點(diǎn)下班！）
● 節(jié)約溶劑，降低成本、保護(hù)環(huán)境（省錢(qián)?。?/span>
● 減少分析時(shí)間過(guò)長(zhǎng)的項(xiàng)目耗時(shí)（早點(diǎn)下班！）
想要達(dá)成以上目的，可以通過(guò)提高流速、縮短色譜柱長(zhǎng)度和內(nèi)徑等方法進(jìn)行分析調(diào)整。但是，如果直接縮短柱長(zhǎng)或提高流速，可能會(huì)對(duì)分離造成不良影響，或使目標(biāo)化合物無(wú)法溶出、洗脫。反過(guò)來(lái)說(shuō)，選擇分離能力強(qiáng)的色譜柱非常關(guān)鍵。
那么，分離能力受哪些因素影響呢？說(shuō)起背后的原理和實(shí)際操作之間的聯(lián)系，一篇文章可說(shuō)不完~
因此，鴻朗又開(kāi)了新的液相豆丁帖——快速分析中色譜柱的選擇系列攻略，希望能在結(jié)合實(shí)際操作的同時(shí)，和大家一起探討色譜分析背后的奇妙原理~
那么，今天將對(duì)快速分析時(shí)的關(guān)鍵因素——粒徑進(jìn)行介紹~
01
粒徑
理論塔板數(shù) N（柱效）= L / H
↓
柱效下降，分離變差
↓
為保證分離，應(yīng)選用小粒徑柱
（3 μm、2 μm）
Van Deemter方程
范德姆特方程我們都很熟悉了：
H = A + B/u + Cu
A : 渦流擴(kuò)散項(xiàng)
?由粒徑大小決定
B/u : 縱向擴(kuò)散項(xiàng)
?流速越小數(shù)值越大
Cu：傳質(zhì)阻力項(xiàng)
?與粒徑大小和流速有關(guān)
相比5 μm柱，3 μm和2 μm柱：
?在同等流速下，理論塔板高度更小
（同等柱長(zhǎng)，柱效更高）
?即使在更高流速下，也能保持較低理論塔板高度
（高流速下，也能得到高柱效）
▲粒徑與柱長(zhǎng)
樣品：
①地昔帕明 ②丙咪嗪 ③地昔帕明 ④阿米替林 ⑤*丙咪嗪
如上圖，分別使用不同粒徑、不同柱長(zhǎng)的IF（S2）和兩款MGIII（S3和S5）色譜柱，對(duì)5種抗抑郁藥進(jìn)行了分析。
可以看出，當(dāng)粒徑由5 μm變?yōu)? μm、3 μm變?yōu)? μm時(shí)，分別對(duì)應(yīng)150 mm、100 mm和50 mm長(zhǎng)度的色譜柱，終，在同等理論塔板數(shù)的前提下，分析時(shí)間大幅縮短。
也就是說(shuō)：小粒徑色譜柱能得到更尖銳的峰形和更高的理論塔板數(shù)；縮短色譜柱長(zhǎng)度，可相應(yīng)縮短分析時(shí)間。
那么，柱長(zhǎng)和粒徑之間的換算關(guān)系如何呢？
分離效率：L / Dp
以L / Dp = 50000為前提，
250 mm L，5 μm
↓
150 mm L, 3 μm
or
100 mm L, 2 μm
↓
因此，為保證分離
在縮短柱長(zhǎng)的同時(shí)，應(yīng)選用小粒徑柱
