說到混合型液相色譜柱,它是一種能夠發(fā)生多種相互作用模式的色譜柱,作為色譜分離的核心,在目前的液相色譜分析中發(fā)揮著重要的作用。混合模式的色譜柱也是種類繁多,有雙重混合模式的,也有三重混合模式的。雙重混合模式包括:反相+陽離子交換,反相+陰離子交換,反相+HILIC等。三重混合模式包括:反相+陽離子交換+陰離子交換,HILIC+陽離子交換+陰離子交換等。
混合模式色譜柱由于其多種優(yōu)點(diǎn),實(shí)驗(yàn)人員在分離復(fù)雜樣品時(shí),越來越多的被使用到實(shí)驗(yàn)中,賽默飛擁有的三重混合模式Trinity系列色譜柱在單次運(yùn)行中可同時(shí)分離離子和疏水性分析物,消除了更換色譜柱,使用離子對或使用多種色譜填料的需要。
來來來
我們來隆重介紹一下Acclaim Trinity系列色譜柱。Acclaim Trinity系列均為三重混合模式的色譜柱。又分為P和Q兩個(gè)系列,均采用納米微球-硅膠雜化技術(shù),一個(gè)顆粒上集成了三種分離模式。P系列色譜柱可以同時(shí)分離陽離子、陰離子和非極性化合物。Q系列先賣個(gè)關(guān)子~
圖1. 納米微球-硅膠雜化技術(shù)
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新型Nanopolymer Silica Hybrid(NSH)技術(shù)在對以下物質(zhì)分離時(shí)可以獲得*的色譜性能:
01 | 原料藥和反離子 |
02 | 藥物反離子的篩選 |
03 | 酸性和堿性原料藥及各自反離子的混合物 |
04 | 酸性、堿性和中性原料藥的混合物 |
圖2. Trinity P1柱和Trinity P2柱對比
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使用與維護(hù)
當(dāng)次使用新的色譜柱時(shí),在進(jìn)行任何進(jìn)樣之前,應(yīng)采用流動(dòng)相進(jìn)行*沖洗(例如,在推薦的流速,大約使用 20 柱體積)。
當(dāng)切換到新的流動(dòng)相時(shí), 確保新的流動(dòng)相與色譜柱中以前的流動(dòng)相相容,以避免由于沉淀造成色譜柱堵塞。在進(jìn)行任何進(jìn)樣(例如 20 個(gè)柱體積)之前,應(yīng)*調(diào)節(jié)色譜柱。
使用色譜柱前,需要把系統(tǒng)里置換為含有鹽的水相和有機(jī)相。保證色譜柱一直在帶有緩沖鹽的體系下使用,是對色譜柱較好的維護(hù)。
色譜柱清洗
對于磷酸鹽緩沖液中使用的 3.0 mm 內(nèi)徑色譜柱:
1
在 0.3 mL/min 流速時(shí),使用 5 個(gè)柱體積的 20 mM 磷酸鈉(或鉀)緩沖液, pH 值 6 / 乙腈 v/v 50/50 清洗色譜柱。
2
在 0.3 mL/min 流速時(shí),使用 20 個(gè)柱體積的 100 mM 磷酸鈉(或鉀)緩沖液, pH 值 6 / 乙腈 v/v 90/10 清洗色譜柱(以強(qiáng)力清除滯留的離子物)。
3
在 0.3 mL/min 流速時(shí),使用 5 個(gè)柱體積的 10 mM 磷酸鈉(或鉀)緩沖液, pH 值 6 / 乙腈 v/v 50/50 清洗色譜柱。
4
在 0.3 mL/min 流速時(shí),使用 20 個(gè)柱體積的 10 mM 磷酸鈉(或鉀)緩沖液, pH 值 6.4 / 乙腈 v/v 20/80 清洗色譜柱(以強(qiáng)力清除滯留的疏水污染物)。
5
使用至少 20 個(gè)柱體積流動(dòng)相平衡色譜柱。
典型應(yīng)用
圖3. Trinity P1柱分析氯酸鹽和高氯酸鹽
圖4.Trinity P1同時(shí)分離藥物反離子
圖5.Trinity P2柱分析藥物相關(guān)陰離子和陽離子
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